PCR-metoden (polymerasekædereaktion) er "guldstandarden" af moderne DNA-diagnostik, en meget følsom metode for molekylærbiologi. PCR-metoden anvendes i medicin, genetik, kriminologi og andre områder. Det anvendes ofte og med succes i diagnosen af mange smitsomme sygdomme.
Diagnose af infektionssygdomme ved hjælp af PCR
PCR-testen tillader detektering af ikke kun selve patogenet, men endog et enkelt fragment af fremmed DNA i det undersøgte materiale. Det undersøgte (biologiske) materiale er: venøst blod, epithelceller og hemmeligheden i genitalkanalen, sædceller, spyt, sputum og andre biologiske udskillelser. Det krævede biologiske materiale bestemmes af den påståede sygdom.
PCR-metoden i vores tid er selvfølgelig et stærkt diagnostisk værktøj. Måske er den eneste ulempe ved undersøgelsen den høje pris.
I listen over sygdomme, hvis tilstedeværelse kan bestemmes ved PCR-metoden:
- viral og bakteriel lungebetændelse;
- tuberkulose;
- mæslinger, røde hunde, parotitis;
- infektiøs hepatitis af alle former;
- salmonellose, difteri;
- Helicobacteriosis og sygdomme forårsaget af intestinale infektioner;
- STD'er (seksuelt overførte sygdomme): gonoré, klamydia, ureaplasmose, syfilis, aids, genital herpes, gardnerellez og andre.
STI screening ved hjælp af PCR metoden
I modsætning til traditionelle analyser muliggør PCR-teknikken detektion af seksuelt overførte infektioner (STI'er), selvom deres symptomer er fuldstændig fraværende. Til indsamling af biologisk materiale skropes kvinder epitelceller i livmoderhalskanalen, mænd - skrabning af urinrøret. Om nødvendigt gennemfører PCR-metoden en undersøgelse af venøst blod.
Således gør en STI-test ved hjælp af PCR-metoden det muligt at identificere:
- human immunodeficiency virus (HIV);
- bleg treponemus (årsagssygdomme for syfilis);
- Herpes simplex virus og cytomegalovirus;
- human papillomavirus (HPV);
- chlamydia, toxoplasma, mycoplasmer, ureaplasma og andre seksuelle infektioner.
Hvis PCR-analysen udføres korrekt, er sandsynligheden for falske positive resultater udelukket. Separat bør nævnes human papillomavirus (HPV) og betydningen af PCR-metoden til diagnose. I modsætning til det onkocytologiske udseende kan PCR-metoden bestemme en bestemt type HPV, især dens onkogene typer 16 og 18, hvis tilstedeværelse truer en kvinde med en så alvorlig og ofte dødelig sygdom som livmoderhalskræft . Tidlig påvisning af onkogene typer af HPV ved PCR-metoden giver ofte mulighed for at forhindre udvikling af livmoderhalskræft.
Immunoenzymanalyse (ELISA) og polymerasekædereaktion (PCR) metode: plusser og minusser
Hvilken diagnosemetode er bedre: PCR eller ELISA? Det korrekte svar på dette spørgsmål eksisterer ikke, da diagnosen ved hjælp af disse to studier har forskellige formål. Og oftere anvendes metoder IFA og PTSR i et kompleks.
PCR-testen er nødvendig for at bestemme infektions specifikke årsagsmiddel, det kan detekteres umiddelbart efter infektion, på trods af manglende symptomatisk manifestation af sygdommen. Denne metode er ideel til at detektere skjulte og kroniske bakterielle og virale infektioner.
I modsætning til PCR-teknikken er ELISA-metoden designet til ikke at detektere infektions forårsagende middel, men immunresponset af organismen for det, dvs. at detektere tilstedeværelsen og mængden af antistoffer mod et bestemt patogen. Afhængigt af typen af antistoffer der er påvist (IgM, IgA, IgG), kan udviklingsstadiet af den infektiøse proces bestemmes.
Både metoder og PCR og ELISA har høj pålidelighed (henholdsvis 100 og 90%). Men det er vigtigt at bemærke, at analysen af ELISA i nogle tilfælde giver falsk positiv (hvis en person har været syg med en bestemt sygdom tidligere) eller falsk-negativ (hvis infektionen blev forløbet relativt nylig) resulterede.